由于心腦血管疾病患者使用抗血小板藥物有時(shí)效果不理想，導(dǎo)致預(yù)后不佳，繼而發(fā)現(xiàn)治療后血小板剩余活性與預(yù)后相關(guān)，似乎通過監(jiān)測血小板活性來調(diào)整用藥有助于改善預(yù)后（然而至今仍有爭議），因此越來越多的血小板功能檢測技術(shù)被開發(fā)利用，因課題所需本人曾試用過多種檢測方法，在此做一簡評(píng)，希望有助于增進(jìn)實(shí)驗(yàn)室人員對血小板功能檢測的了解。
血小板聚集試驗(yàn)（光學(xué)濁度法，LTA）：
盡管血小板聚集試驗(yàn)費(fèi)時(shí)費(fèi)力、受影響因素多，但仍是最基本和必備的血小板功能檢測方法，若能確保規(guī)范地標(biāo)本處理和檢測，結(jié)果準(zhǔn)確性并不遜于其他方法學(xué)。常用五種誘導(dǎo)劑中，二磷酸腺苷（ADP）、花生四烯酸、腎上腺素與膠原分別對應(yīng)四種血小板活化途徑，瑞斯托霉素誘導(dǎo)的血小板聚集一定程度上反映的是血小板的粘附功能。ADP和花生四烯酸誘導(dǎo)劑常用于抗血小板藥的監(jiān)測，其聚集率所反映的血小板剩余活性與抗血小板治療預(yù)后顯著相關(guān)。
“標(biāo)準(zhǔn)化”對于血小板聚集試驗(yàn)?zāi)軌蚓S持生命力至關(guān)重要，所以多寫一點(diǎn)，以下內(nèi)容主要摘自CLSI H58-A指南：
LTA聚集試驗(yàn)對標(biāo)本的要求與常規(guī)凝血檢查基本相同，但對標(biāo)本運(yùn)送時(shí)間及避免脂血、黃疸方面要求更嚴(yán)格。理想時(shí)間是采血后2小時(shí)內(nèi)完成檢測，最大允許時(shí)間是4小時(shí)內(nèi)。
LTA檢測對富血小板血漿（PRP）的PLT數(shù)量要求最好在100-400×109/L之間，低于100×109/L可致聚集率偏低，超過400×109/L時(shí)建議用乏血小板血漿（PPP）調(diào)整到200-250×109/L。推薦的PRP離心條件是170g/15min，各種文獻(xiàn)應(yīng)用的離心條件范圍是：100-250g/10-15min。推薦的PPP離心條件是1500g/15min，確保PPP中PLT計(jì)數(shù)<10×109/L。PRP離心完成后，建議放置15min血小板活性穩(wěn)定后再開始檢測。
下表列出了各種誘導(dǎo)劑推薦的使用終濃度：
血栓彈力圖（TEG）：
TEG有專用于抗血小板藥物監(jiān)測的血小板圖試驗(yàn)，標(biāo)本處理相比于LTA更簡便，受標(biāo)本限制也更少（PLT計(jì)數(shù)低、脂血標(biāo)本等也可檢測），但并無證據(jù)顯示其反映血小板功能水平及指導(dǎo)用藥比LTA更準(zhǔn)確或有效，在其昂貴的費(fèi)用與易用性之間如何選擇見仁見智。
CYP2C19基因型檢測：
主要檢測*2、*3等位基因，常用方法有基因芯片法和測序法，反映對氯吡格雷的代謝情況。慢代謝基因型通常應(yīng)用氯吡格雷效果不佳，但與預(yù)后相關(guān)性有爭議，中國人群的中、慢代謝型比例很高（超過50%），應(yīng)用價(jià)值也更小。
VASP磷酸化檢測：
常用流式細(xì)胞術(shù)或ELISA法。商品化的VASP流式檢測試劑盒非常易用，甚至并不比血小板聚集試驗(yàn)麻煩多少，而且標(biāo)本采集后48小時(shí)內(nèi)處理均可，有利于集中檢測。特異性針對P2Y12受體拮抗藥（如氯吡格雷、替格瑞洛）。或許也是藥物代謝基因型的差異，應(yīng)用氯吡格雷的中國人群中VASP檢測的血小板反應(yīng)指數(shù)(PRI)較西方人群高，可能有必要提高判斷閾值（一般PRI>50%提示抵抗）。從診斷效率上來說，用于普拉格雷、替格瑞洛等新型P2Y12拮抗藥或許價(jià)值更大。
PFA-200：
作為一期止血篩查試驗(yàn)，其COL/EP試劑包可用于血小板及VWF的功能缺陷篩查，結(jié)合COL/ADP試劑包可評(píng)估阿司匹林藥效，P2Y試劑包可用于評(píng)估P2Y12受體拮抗藥。該試驗(yàn)受影響因素較多，HCT、PLT數(shù)量等等都可能影響閉孔時(shí)間的長短，檢測重復(fù)性一般，在抗血小板監(jiān)測方面其特異性和易用性不及同為POCT的Verifynow，成本上或許有優(yōu)勢。
Verifynow：
目前西方抗血小板監(jiān)測相關(guān)臨床試驗(yàn)主要應(yīng)用方法，最簡便、特異性高，貴。
總的來說，監(jiān)測P2Y12受體拮抗藥方面，與ADP誘導(dǎo)的血小板聚集試驗(yàn)及TEG相比，VASP、PFA及Verifynow提高特異性的方法基本都是通過加入前列腺素PGE-1來實(shí)現(xiàn)，PGE-1可抑制P2Y1、IP等受體途徑，使P2Y12受體拮抗藥的作用更突出。然而血小板活化途徑繁多，抗血小板藥物間也存在協(xié)同效應(yīng)，特異性高的方法往往不易反映血小板的整體活性，因此也與抗血小板治療患者預(yù)后的相關(guān)度不高，根據(jù)其結(jié)果來調(diào)整治療方案的效果就更難說。目前的多數(shù)大樣本臨床試驗(yàn)都表明，這些特異性的實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測方法所反映出的抗血小板藥物抵抗性，似乎不是可修正的危險(xiǎn)因素。所以，各種新技術(shù)應(yīng)用價(jià)值尚無定論之前，對于臨床實(shí)驗(yàn)室來說，踏踏實(shí)實(shí)做好血小板聚集試驗(yàn)可能意義更大。
